ข้อควรพิจารณาในการออกแบบที่สำคัญสำหรับโปรโตคอลการศึกษาการตรวจสอบความถูกต้องของไวรัสของผลิตภัณฑ์ยีนบำบัด

ICH Q5A(R2)-มูลนิธิประสานระหว่างประเทศ

ICH Q5A(R2) ได้รับการรับรองอย่างเป็นทางการเมื่อวันที่ 1 พฤศจิกายน 2023 และถือเป็นเอกสารแนวปฏิบัติหลักระหว่างประเทศสำหรับการประเมินความปลอดภัยของไวรัส เมื่อเปรียบเทียบกับ Q5A(R1) ที่เผยแพร่ในปี 2542 การอัปเดตที่สำคัญในเวอร์ชัน R2 ประกอบด้วย บทที่เพิ่มเข้ามาใหม่เกี่ยวกับการประเมินความปลอดภัยของไวรัสในการผลิตต่อเนื่อง (บทที่ 7); บทบาทเสริมของการประเมินความเสี่ยงในฐานะรากฐานของกลยุทธ์การกวาดล้างไวรัส การรวม-ลำดับเจนเนอเรชั่นถัดไป (NGS) ในการพิจารณาการตรวจจับไวรัส และข้อกำหนดที่ชัดเจนสำหรับการประเมินผลิตภัณฑ์ใหม่และกระบวนการผลิต Q5A(R2) ได้รับการรับรองโดยหน่วยงานกำกับดูแล รวมถึง FDA, EMA และ PMDA ซึ่งถือเป็นกรอบทางเทคนิคที่เป็นหนึ่งเดียวสำหรับการตรวจสอบความถูกต้องของไวรัสทั่วโลก

NMPA-ระบบการกำกับดูแลของจีน

กรอบการกำกับดูแล NMPA สำหรับความปลอดภัยของไวรัสครอบคลุมหลายระดับ:

ระดับเอกสาร	ชื่อเอกสาร	ปีที่ออก
เอกสารพื้นฐาน	แนวทางทางเทคนิคสำหรับการกำจัด/ยับยั้งไวรัสจากผลิตภัณฑ์ในเลือด	2002
เอกสารพื้นฐาน	หลักการทั่วไปสำหรับการทบทวนทางเทคนิคของการประเมินความปลอดภัยของไวรัสของเนื้อเยื่อชีวภาพ-ผลิตภัณฑ์ที่ได้รับและเซลล์ยูคาริโอต-ผลิตภัณฑ์ที่แสดงออก	2005
หลักเกณฑ์เฉพาะผลิตภัณฑ์-	แนวทางทางเทคนิคสำหรับการวิจัยทางเภสัชกรรมและการประเมินการใช้งานการทดลองทางคลินิกสำหรับเวกเตอร์ไวรัส Recombinant Adeno (rAAV) -ในผลิตภัณฑ์บำบัดด้วยยีน Vivo	2023
หลักเกณฑ์เฉพาะผลิตภัณฑ์-	ข้อกำหนดทางเทคนิคทั่วไปสำหรับคุณภาพทางเภสัชกรรมของ Recombinant Adeno-เวกเตอร์ที่เกี่ยวข้องกับไวรัส (rAAV)- ซึ่งอิงในผลิตภัณฑ์ยีนบำบัด Vivo สำหรับการสมัครขออนุมัติการตลาด	2025
แนวทางที่เป็นนวัตกรรม	แนวทางทางเทคนิคสำหรับการตรวจสอบความถูกต้องของแพลตฟอร์มของกระบวนการกำจัดไวรัสสำหรับการใช้งานทดลองทางคลินิกของผลิตภัณฑ์รีคอมบิแนนท์โปรตีนเพื่อการรักษา (การทดลอง)a	2024

ตอบ: แนวปฏิบัตินี้เป็นครั้งแรกที่หน่วยงานกำกับดูแลของจีนได้กำหนดข้อกำหนดทางเทคนิคที่เป็นระบบสำหรับการตรวจสอบแพลตฟอร์มของกระบวนการกวาดล้างไวรัส และสอดคล้องกับเจตนารมณ์ของ ICH Q5A(R2)

FDA และ EMA-ข้อกำหนดด้านกฎระเบียบของสหรัฐอเมริกาและยุโรป

FDA ได้ออกเอกสารคำแนะนำด้านอุตสาหกรรมอย่างเป็นทางการโดยอิงตาม ICH Q5A(R2) ในเดือนมกราคม 2024 นอกจากนี้ บทเภสัชตำรับของสหรัฐอเมริกา (USP)<1050.1>ให้คำแนะนำด้านเทคนิคเพิ่มเติมเกี่ยวกับการออกแบบ การประเมิน และการกำหนดลักษณะเฉพาะของขั้นตอนการกวาดล้างไวรัส FDA จะจัด Viral Clearance Symposium ทุกสองปี การประชุมสัมมนาประจำปี 2023 กล่าวถึง-หัวข้อที่ล้ำหน้า เช่น รูปแบบใหม่ การผลิตแบบต่อเนื่อง สื่อโครมาโตกราฟีแบบใหม่ และฟิลเตอร์ดูดซับ เอกสารคำแนะนำหลักของ EMA ได้แก่ CPMP/BWP/268/95 (หมายเหตุสำหรับคำแนะนำเกี่ยวกับการศึกษาการตรวจสอบความถูกต้องของไวรัส: การออกแบบ การมีส่วนร่วม และการตีความการศึกษาการตรวจสอบความถูกต้องของการยับยั้งและการกำจัดไวรัส) และ EMEA/CHMP/BWP/398498/2005 (แนวทางการประเมินความปลอดภัยของไวรัสของผลิตภัณฑ์ยาเพื่อการวิจัยด้านเทคโนโลยีชีวภาพ) ซึ่งทั้งสองฉบับมีความสอดคล้องกับ ICH Q5A(R2)

การระบุแหล่งที่มาของการปนเปื้อนของไวรัส

ICH Q5A(R2) เน้นย้ำว่าการออกแบบการตรวจสอบความถูกต้องของการกวาดล้างไวรัสควรอยู่บนพื้นฐานของการประเมินความเสี่ยงที่ครอบคลุม สำหรับผลิตภัณฑ์ยีนบำบัด การระบุแหล่งที่มาของการปนเปื้อนของไวรัสควรอยู่ในระดับต่อไปนี้:

ระดับเซลล์แบงค์: ไวรัสภายนอก (เช่น อนุภาครีโทรไวรัส) และไวรัสติดเชื้อที่แฝงอยู่ซึ่งอาจสะสมอยู่ในสารตั้งต้นของเซลล์การผลิต (เช่น HEK293, CHO, HeLa) เป็นที่ทราบกันว่าเซลล์ HEK293 มีลำดับ Ad5 E1 ภายนอกและแฟรกเมนต์ EBV ประมาณ 900 bp และสามารถแสดงการจำลองแบบ- adenovirus ที่มีความสามารถได้ ดังนั้นควรให้ความสนใจเป็นพิเศษกับความเสี่ยงนี้ในการประเมินความเสี่ยง

ระดับไวรัสตัวช่วย: การผลิตเวกเตอร์ AAV โดยทั่วไปใช้วิธีการต่างๆ เช่น การเปลี่ยนถ่ายเป็นสามเท่าโดยใช้พลาสมิดของตัวช่วย ซึ่งเสี่ยงต่อการสร้างการจำลองแบบ-อะดีโนไวรัส (RCA) ที่มีความสามารถ ในทำนองเดียวกัน เซลล์บรรจุภัณฑ์ที่ใช้ในการผลิตเวกเตอร์เลนติไวรัสอาจสร้าง-เลนติไวรัสที่มีความสามารถในการจำลอง (RCL)

ระดับวัตถุดิบ: ไวรัสอันตรายอาจแพร่กระจายผ่านวัตถุดิบที่ใช้ในการผลิต รวมถึงอาหารเลี้ยงเซลล์ อาหาร และเอนไซม์ ความเสี่ยงนี้มีความสำคัญอย่างยิ่งเมื่อมีการใช้ส่วนประกอบที่ได้จากสัตว์- (เช่น ซีรั่มของวัวในครรภ์ สารละลายทริปซินย่อย)

ความแตกต่างด้านความเสี่ยง: ยีนบำบัดกับโปรตีนรีคอมบิแนนท์แบบดั้งเดิม

มิติความเสี่ยง	ผลิตภัณฑ์โปรตีนรีคอมบิแนนท์แบบดั้งเดิม	ผลิตภัณฑ์ยีนบำบัด
แหล่งที่มาของไวรัส	ไวรัสภายนอกจากธนาคารเซลล์ ไวรัสที่อันตราย	ไวรัสธนาคารเซลล์ ไวรัสตัวช่วย การจำลองแบบ-เวกเตอร์ที่มีความสามารถ (RCV/RCL); การรวมจีโนมของโฮสต์
สารตั้งต้นของเซลล์	CHO, NS0, Sp2/0 และเส้นเซลล์ที่มีลักษณะเฉพาะอื่นๆ-	HEK293, HeLa, CHO ฯลฯ เซลล์บางเส้นมีต้นกำเนิดจากเนื้องอก
ลักษณะผลิตภัณฑ์	ยาที่มีโปรตีน-เป็นหลัก โครงสร้างที่กำหนดไว้อย่างดี-	เวกเตอร์ไวรัส; ก่อให้เกิดความเสี่ยงด้านความปลอดภัยทางชีวภาพ
กลยุทธ์การตรวจสอบ	การกวาดล้างไวรัสแบบหลาย-ขั้นตอน; เน้นการตรวจสอบขั้นตอนกระบวนการ	จำเป็นต้องมีการตรวจจับ RCV/RCL; การตรวจสอบและการทดสอบทั้งที่จำเป็น
การตรวจสอบความถูกต้องของแพลตฟอร์ม	ใช้ได้กับกระบวนการที่กำหนดไว้ เช่น S/D, pH ต่ำ, นาโนฟิลเตรชัน	การบังคับใช้มีจำกัดเนื่องจากความหลากหลายของประเภทเวกเตอร์

ตารางที่ 1 การเปรียบเทียบความเสี่ยงด้านความปลอดภัยของไวรัส: ผลิตภัณฑ์บำบัดด้วยยีนกับผลิตภัณฑ์โปรตีนรีคอมบิแนนท์แบบดั้งเดิม

หลักการทั่วไป

การเลือกตัวบ่งชี้ไวรัสเป็นองค์ประกอบสำคัญในการออกแบบโปรโตคอลการตรวจสอบความถูกต้องของไวรัส ICH Q5A(R2) กำหนดให้การเลือกไวรัสบ่งชี้ขึ้นอยู่กับการประเมินความเสี่ยง และคำนึงถึงปัจจัยต่อไปนี้:

ความเกี่ยวข้องของไวรัสกับสารตั้งต้นของเซลล์การผลิต (ไวรัสที่เกี่ยวข้อง)

คุณสมบัติทางเคมีฟิสิกส์ของไวรัส (แบบห่อหุ้ม/ไม่ห่อหุ้ม-, DNA/RNA, ช่วงขนาด)

ความต้านทานของไวรัสต่อการรักษาทางกายภาพ/เคมี

การตรวจจับและความปลอดภัยทางชีวภาพของไวรัส

สำหรับผลิตภัณฑ์ยีนบำบัด การเลือกไวรัสบ่งชี้ต้องพิจารณาเพิ่มเติม: บทบาทของไวรัสพาหะในฐานะ "ไวรัสที่เกี่ยวข้อง"; ความเสี่ยงที่อาจเกิดขึ้นจากการปนเปื้อนของไวรัสตัวช่วย และข้อกำหนดการตรวจจับและการตรวจสอบสำหรับการจำลอง-ไวรัสที่มีความสามารถในการจำลอง (RCV/RCL)

แผงตัวบ่งชี้ไวรัสที่แนะนำ

ไวรัส	พิมพ์	ซองจดหมาย	จีโนม	ขนาด (นาโนเมตร)	เหตุผลในการคัดเลือก / การประยุกต์ใช้
เอ็มวีเอ็ม	พาร์โวไวรัส	ไม่มี	ssDNA	18–26	โมเดลที่ไม่-ห่อหุ้ม; ขนาดที่เล็กที่สุดและความต้านทานสูงสุด เหมาะสำหรับการตรวจสอบความถูกต้องของการกรองนาโน (โดยทั่วไปใช้ไม่ได้กับผลิตภัณฑ์เวกเตอร์ raAV)
พีพีวี	พาร์โวไวรัส	ไม่มี	ssDNA	18–26	โมเดลที่ไม่-ห่อหุ้ม; ไวรัสบ่งชี้ที่ใช้กันทั่วไปสำหรับผลิตภัณฑ์ในเลือด
Reo-3	รีโอไวรัส	ไม่มี	ดีเอสอาร์เอ็นเอ	60–80	โมเดลที่ไม่-ห่อหุ้ม; ขนาดกลาง ความมั่นคงทางกายภาพสูง
พีอาร์วี	เริมไวรัส	ใช่	ดีเอสดีเอ็นเอ	150–200	แบบห่อหุ้ม; ขนาดใหญ่ ช่วงโฮสต์ที่กว้าง
X-MuLV	รีโทรไวรัส	ใช่	เอสเอสอาร์เอ็นเอ	80–110	โมเดลรีโทรไวรัสแบบห่อหุ้ม เหมาะสำหรับซับสเตรตของเซลล์ที่ได้รับ CHO{0}}
บีวีดีวี	ฟลาวิวิริแด	ใช่	เอสเอสอาร์เอ็นเอ	40–60	แบบห่อหุ้ม; ใช้ในการประเมินวิธีการยับยั้งสารเคมี (HCV surrogate)
วีเอสวี	แรบโดวิริดี	ใช่	เอสเอสอาร์เอ็นเอ	70	แบบห่อหุ้ม; ความทนทานต่อค่า pH กว้าง เหมาะสำหรับการตรวจสอบการปิดใช้งาน pH ต่ำ-

ตารางที่ 2 แผงตัวบ่งชี้ไวรัสที่แนะนำสำหรับการตรวจสอบความถูกต้องของไวรัสของผลิตภัณฑ์บำบัดด้วยยีน

ข้อควรพิจารณาพิเศษสำหรับผลิตภัณฑ์ AAV Vector

สำหรับผลิตภัณฑ์เวกเตอร์ AAV ชนิดลูกผสม หลักเกณฑ์ทางเทคนิคของ NMPA สำหรับการวิจัยทางเภสัชกรรมและการประเมินการใช้งานการทดลองทางคลินิกสำหรับเวกเตอร์ rAAV-ที่อยู่ในผลิตภัณฑ์บำบัดด้วยยีน Vivo ต้องการความสนใจในการตรวจหา- AAV ที่มีความสามารถ (rcAAV) ที่มีความสามารถ rcAAV อ้างอิงถึง AAV ที่มีความสามารถในการจำลองแบบอัตโนมัติ ซึ่งโดยทั่วไปเกิดจากการรวมตัวกันอีกครั้งที่คล้ายคลึงกันระหว่างพลาสมิดของเฮลเปอร์และจีโนม AAV ของผลิตภัณฑ์ โดยทั่วไปการตรวจหา rcAAV จะดำเนินการโดยใช้การตรวจวิเคราะห์การติดเชื้อหรือวิธี qPCR ซึ่งดำเนินการแยกกันกับสารตัวยาและผลิตภัณฑ์บริสุทธิ์

เป็นที่น่าสังเกตว่ากระบวนการทำให้บริสุทธิ์ขั้นปลายสำหรับผลิตภัณฑ์เวกเตอร์ AAV โดยทั่วไปประกอบด้วยการย่อยด้วยนิวคลีเอส, โครมาโทกราฟี (AEX), นาโนฟิลเตรชัน และโครมาโทกราฟีแบบแลกเปลี่ยนไอออน (CEX/IEX) ในการตรวจสอบความถูกต้องของการกวาดล้างไวรัสแบบดั้งเดิม ขั้นตอนกระบวนการเหล่านี้อาจส่งผลให้เกิดการสูญเสียเวกเตอร์ AAV อย่างมีนัยสำคัญ ดังนั้น ปฏิสัมพันธ์ระหว่างไวรัสเวกเตอร์และตัวบ่งชี้จะต้องได้รับการพิจารณาอย่างรอบคอบในระหว่างการออกแบบโมเดลดาวน์ขนาด- สำหรับขั้นตอนกระบวนการบางอย่าง (เช่น การกรองนาโน) ซึ่งการสูญเสียเวกเตอร์ AAV มีความสำคัญ ควรประเมินว่าการปรับกระบวนการได้รับการรับประกันตามข้อมูลการตรวจสอบความถูกต้องหรือไม่ (เช่น การปรับขนาดรูพรุนของเมมเบรนกรองนาโน)

หลักการทั่วไป

โมเดลการลดขนาด- (SDM) เป็นเครื่องมือหลักสำหรับการตรวจสอบความถูกต้องของไวรัส การออกแบบจะต้องแสดงถึงประสิทธิภาพการกวาดล้างไวรัสของกระบวนการผลิตอย่างถูกต้อง ICH Q5A(R2) ส่วนที่ 6.2.2 กำหนดไว้อย่างชัดเจนว่าโมเดลขนาดลดลง-จะต้องรักษาความสอดคล้องกับกระบวนการผลิตในพารามิเตอร์หลัก สำหรับผลิตภัณฑ์ยีนบำบัด ข้อควรพิจารณาต่อไปนี้มีความสำคัญอย่างยิ่งในการออกแบบ SDM:

ความเป็นตัวแทนของพารามิเตอร์กระบวนการที่สำคัญ

แบบจำลองการลดขนาด-ควรสอดคล้องกับกระบวนการผลิตในพารามิเตอร์ต่อไปนี้: สภาวะทางโครมาโตกราฟี (องค์ประกอบของบัฟเฟอร์, pH, สภาพการนำไฟฟ้า); อัตราส่วนการโหลด (อัตราส่วนมวลโปรตีนเวกเตอร์/ส่วนเหนือตะกอน); เวลาและอุณหภูมิสัมผัส อัตราการไหล/เวลาอยู่อาศัย ความบริสุทธิ์และองค์ประกอบของผลิตภัณฑ์ สำหรับผลิตภัณฑ์ AAV ควรกล่าวถึงผลกระทบของการกระจายขนาดอนุภาคเวกเตอร์และปริมาณแคปซิดเปล่าต่อประสิทธิภาพการกรองนาโนโดยเฉพาะ

ข้อกำหนดคุณสมบัติแบบจำลอง

ICH Q5A(R2) ต้องการคุณสมบัติที่เพียงพอของแบบจำลองขนาด-ที่ลดลง ซึ่งรวมถึง: การเปรียบเทียบคุณลักษณะด้านคุณภาพผลิตภัณฑ์ (เช่น ความบริสุทธิ์ การคืนสภาพ ความหนาแน่น) คุณสมบัติของความสอดคล้องของพารามิเตอร์กระบวนการวิกฤต และรับรองว่าโมเดลการลดขนาด-จะบันทึกความแปรปรวนของกระบวนการของกระบวนการผลิต สำหรับขั้นตอนโครมาโตกราฟี ควรมีคุณสมบัติความสม่ำเสมอของโปรไฟล์สูงสุด การชะล้าง และการล้าง สำหรับขั้นตอนการกรองระดับนาโน ควรตรวจสอบผลกระทบของความจุปริมาตรและองค์ประกอบของผลิตภัณฑ์

สูตรคำนวณ LRV

ค่าการลดบันทึก (LRV) เป็นตัวชี้วัดหลักในการวัดประสิทธิภาพการกวาดล้างไวรัส ICH Q5A(R2) ส่วนที่ 6.5 ให้คำอธิบายโดยละเอียดเกี่ยวกับวิธีการคำนวณ LRV และการรักษาทางสถิติ สูตรการคำนวณ LRV พื้นฐานคือ: LRV=log₁₀(N₀/N) โดยที่ N₀ เป็นตัวไทเทอร์ไวรัสเริ่มต้นหลังจากไวรัสพุ่งสูงขึ้น และ N คือไทเทอร์ไวรัสที่ตกค้างหลังการบำบัดกระบวนการ เมื่อไทเตอร์ไวรัสตกค้างต่ำกว่าขีดจำกัดการตรวจจับของการทดสอบ ควรใช้วิธีการประมาณค่า เช่น การกระจายปัวซอง (เช่น การทดสอบในปริมาณมาก-)

การประยุกต์ใช้ช่วงความเชื่อมั่น

ทั้ง ICH Q5A(R2) และ EMA CPMP/BWP/268/95 จำเป็นต้องมีการประเมินช่วงความเชื่อมั่นของผลการคำนวณ LRV โดยทั่วไปจะใช้ช่วงความเชื่อมั่น 95%

เกณฑ์ประสิทธิผล

ตามแนวทางทางเทคนิคของ NMPA สำหรับการกำจัด/การปิดใช้งานไวรัสจากผลิตภัณฑ์ในเลือด การลดไวรัสที่มากกว่าหรือเท่ากับ 4 บันทึกบ่งชี้ว่าขั้นตอนกระบวนการมีประสิทธิผลสำหรับการกำจัด/การปิดใช้งานไวรัส อย่างไรก็ตาม เกณฑ์นี้ไม่ใช่เกณฑ์ที่แน่นอน และควรได้รับการประเมินในลักษณะองค์รวมร่วมกับกราฟจลนศาสตร์ของการปิดใช้งาน เหตุผลทางวิทยาศาสตร์สำหรับการเลือกไวรัสตัวบ่งชี้ และความสมบูรณ์โดยรวมของการออกแบบโปรโตคอลการตรวจสอบ สำหรับผลิตภัณฑ์ยีนบำบัด ควรให้ความสนใจเป็นพิเศษกับความสามารถในการกวาดล้างสะสมในทุกขั้นตอนเพื่อให้แน่ใจว่าโปรไฟล์ความปลอดภัยของไวรัสโดยรวมอยู่ในระดับที่ยอมรับได้

การประยุกต์ใช้และความท้าทายของการกรองนาโน

การกรองแบบกักเก็บไวรัส- (นาโนฟิลเตรชัน) เป็นขั้นตอนการกำจัดไวรัสที่สำคัญในการทำให้ผลิตภัณฑ์บำบัดด้วยยีนขั้นปลายน้ำ ตัวกรองกักไวรัส-โดยทั่วไปจะมีรูพรุนขนาดประมาณ 20 นาโนเมตร กลไกการกำจัดไวรัสของนาโนฟิลเตรชันนั้นโดยพื้นฐานแล้วเป็นการยกเว้นตามขนาด- และสามารถกำจัดไวรัสส่วนใหญ่ที่มีขนาดใหญ่กว่าขนาดรูพรุนของเมมเบรนได้อย่างมีประสิทธิภาพ รวมถึงพาร์โวไวรัสขนาดเล็กที่ไม่ห่อหุ้ม- เช่น MVM และ PPV

อย่างไรก็ตาม การกรองนาโนสำหรับผลิตภัณฑ์ยีนบำบัดเผชิญกับความท้าทายที่ไม่เหมือนใคร: ขนาดของเวกเตอร์ AAV (ประมาณ 20–26 นาโนเมตร) นั้นคล้ายคลึงกับขนาดของไวรัสตัวบ่งชี้บางตัว (เช่น MVM, 18–26 นาโนเมตร) ซึ่งอาจส่งผลให้การกู้คืนเวกเตอร์ลดลง แคปซิดเปล่าอาจส่งผลต่อฟลักซ์การกรองและประสิทธิภาพการกักเก็บไวรัส ความหนืดของตัวอย่างอาจเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญตามความเข้มข้นของเวกเตอร์ ดังนั้น การออกแบบ SDM สำหรับการตรวจสอบความถูกต้องของการกรองนาโนควรคำนึงถึงผลกระทบของการกระจายขนาดอนุภาคเวกเตอร์และปริมาณแคปซิดเปล่าต่อประสิทธิภาพการกรอง และควรพิจารณาถึงการใช้เมมเบรนนาโนฟิลเตรชันที่มีขนาดรูพรุนที่ใหญ่กว่าตามความเหมาะสม

การประเมินการกวาดล้างไวรัสของขั้นตอนโครมาโตกราฟี

โครมาโตกราฟีแบบแลกเปลี่ยนไอออน (IEX) เป็นขั้นตอนหลักในกระบวนการทำให้ผลิตภัณฑ์บริสุทธิ์ของ AAV โดยทั่วไปจะใช้การย่อยด้วยนิวคลีเอสตามด้วยโครมาโทกราฟีแบบแลกเปลี่ยนประจุลบ (AEX) เพื่อจับแคปซิดที่ว่างเปล่าและมีข้อบกพร่อง หรือโครมาโทกราฟีแบบแลกเปลี่ยนไอออนบวก (CEX) สำหรับการทำให้บริสุทธิ์อย่างละเอียดของแคปซิดแบบเต็ม กลไกการกำจัดไวรัสในขั้นตอนโครมาโตกราฟีรวมถึงการยกเว้นขนาด, อันตรกิริยาของไฟฟ้าสถิต, อันตรกิริยาของสัมพรรคภาพและปัจจัยอื่นๆ การอภิปรายในการประชุม FDA 2023 Viral Clearance Symposium เน้นย้ำว่าประสิทธิภาพการกวาดล้างไวรัสของขั้นตอนโครมาโทกราฟีได้รับอิทธิพลจากปัจจัยหลายประการ รวมถึงความสามารถในการรับน้ำหนัก ค่า pH การนำไฟฟ้า และการหมุนเวียนของเรซิน ควรนำแนวทางการออกแบบมุมฉากแบบหลายปัจจัย-มาใช้เพื่อการประเมินที่ครอบคลุม

การควบคุมความปลอดภัยของไวรัสในการผลิตต่อเนื่อง

บทที่ 7 ที่เพิ่มเข้ามาใหม่ของ ICH Q5A(R2) ได้กำหนดข้อกำหนดเฉพาะสำหรับการประเมินความปลอดภัยของไวรัสในการผลิตต่อเนื่อง สำหรับผลิตภัณฑ์ยีนบำบัด การผลิตอย่างต่อเนื่องกลายเป็นทิศทางการพัฒนาที่สำคัญ แต่ยังนำมาซึ่งความท้าทายใหม่ๆ ด้านความปลอดภัยของไวรัสอีกด้วย กลยุทธ์การควบคุมความปลอดภัยของไวรัสในการผลิตอย่างต่อเนื่องประกอบด้วย: -ตัวกรองอุปสรรคไวรัสในบรรทัดเป็นมาตรการกักกันที่สำคัญ การออกแบบเวลาพักและผังกระบวนการที่เหมาะสม การรวมขั้นตอนการระงับการใช้งานเข้ากับเวลาพักที่กำหนดไว้ และการประยุกต์ใช้เทคโนโลยีการวิเคราะห์กระบวนการ (PAT) ที่ได้รับการปรับปรุงสำหรับการตรวจสอบพารามิเตอร์กระบวนการที่สำคัญแบบเรียลไทม์-